Parameter-Details

Beschreibung

Quantitative Bestimmung von Alpha-1-Antitrypsin im Stuhl mittels Enzym-Immunoassay (EIA)

Synonym

Alpha-1-Proteinase-Inhibitor

Ziel und Zweck der Untersuchung

Alpha-1-Antitrypsin ist ein Akutphasenprotein, das in der Leber synthetisiert wird. Es dient der Inhibition von Serinproteasen. Alpha-1-Antitrypsin wird nahezu unverändert im Stuhl ausgeschieden. Entzündliche Darmerkrankungen wie z.B. Morbus Crohn oder Colitis ulcerosa führen zu einer Destruktion des Darmepithels. Das Auftreten von Alpha-1-Antitrypsin im Stuhl deutet auf eine mit Blutungen in das Darmlumen verbundene Entzündungsreaktion hin.

Eingesetztes Analyseverfahren

Enzym-Immunoassay (EIA) zur Bestimmung von Alpha-1-Antitrypsin im Stuhl (Firma Maier Analytik)

Prinzip des Verfahrens

Der Test basiert auf der Sandwich–Elisa Technik. Es werden zwei ausgewählte polyklonale Antikörper, die humanes Alpha-1-Antitrypsin erkennen, verwendet. Standards, Kontrollen und verdünnte Proben, die auf Alpha-1-Antitrypsin zu untersuchen sind, werden in die Vertiefungen einer Mikrotiterplatte pipettiert, welche mit einem hochaffinen polyklonalen Antikörper (Anti-Alpha-1-Antitrypsin Antikörper, Kaninchen) beschichtet sind. In diesem ersten Inkubationsschritt wird das Alpha-1-Antitrypsin aus der Probe von dem gekoppelten Antikörper (="Fängerantikörper") gebunden. Dann wird das Konjugat, ein Peroxidase-markierter Schaf Anti-Alpha-1-Antikörper, zugegeben und es bildet sich folgender Komplex an der Wand der Mikrotiterplatte: Fängerantikörper - humanes Alpha-1-Antitrypsin - Peroxidase-Konjugat. Als Peroxidasesubstrat wird Tetramethylbenzidin (TMB) eingesetzt. Die Enzymreaktion wird durch Zugabe von Säure abgestoppt. Dadurch erfolgt ein Farbumschlag von blau nach gelb. Die entstandene chromogene Verbindung wird photometrisch bei 450nm gemessen. Die Intensität der Farbe ist der Alpha-1-Antitrypsin-Konzentration direkt proportional. Parallel dazu wird eine Standardkurve - optische Dichte (Absorption bei 450nm) versus Standardkonzentration - erstellt, aus der die Konzentrationen der Proben ermittelt werden.

Analysenfrequenz

zweimal pro Monat

Kennzeichnung "Dringend" ist möglich

Nein

Zusatzinformation für externe Einsender

Diese Analyse ist für interne und externe Einsenderkreise verfügbar

Probenmaterial

Stuhl

Probenmaterial (sonstige)

/

Abnahmegefäß inkl. Zusatzstoffe

Stuhlgefäß

Abnahmegefäß inkl. Zusatzstoffe (sonstige)

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Vorbereitung Patient

/

Probengewinnung

Es sollten mindestens 1 g Stuhl in einem geeigneten Behälter gesammelt werden.

Spezielle Präanalytik (z.B. Probentransport, Versand)

Stuhlproben sollen nicht älter als 3 Tage alt sein.

Sammelperiode

/

Erforderliches Begleitdokument

Anforderungsschein bzw. Überweisungsschein für externe Patient*innen ansonsten interne elektronische Anforderung

Mindestvolumen pro Anforderung
(vor Zentrifugation)

1 g Stuhl

Ergebniseinheiten

mg/dl

Messbereich

10 - 200 mg/dl

Allgemeine Störungen

/

Kreuzreaktionen

Es wurden keine Kreuzreaktionen zu anderen Plasmaproteinen im Stuhl gefunden.

Referenzbereiche

<60 mg/dl

Literatur

Testanleitung der Firma Maier Analytik GmbH, D-74889 Sinsheim.